| 龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶（DLCCoAOMT）基因的克隆和表达分析 |
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| 引用本文： | 陈虎,何新华,罗聪,杨丽涛,张保青,宋修鹏. 龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶（DLCCoAOMT）基因的克隆和表达分析[J]. 中国农业科学, 2012, 45(1): 118-126. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.01.014 |
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| 作者姓名： | 陈虎 何新华 罗聪 杨丽涛 张保青 宋修鹏 |
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| 作者单位： | 1.广西大学农学院，南宁 5300042.广西农业科学院广西作物遗传改良与生物技术重点开放实验室，南宁5300073.广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室，南宁 530004 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划项目(2008BADB8B01,2008BADB8B02);广西自然科学基金项目(2011GXNSFA018115);广西高等学校优秀人才计划项目(桂教人201065);广西研究生创新计划项目(GXU11T31077) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆龙眼咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(DLCCoAOMT)基因，分析其序列特征和在低温胁迫下不同组织中的表达情况并进行原核表达研究。【方法】采用RT-PCR 和RACE 技术从龙眼叶片中克隆DLCCoAOMT基因，用生物信息学方法对获得的氨基酸序列进行分析，利用荧光定量PCR 研究DLCCoAOMT 基因在不同组织中的表达。【结果】克隆得到DLCCoAOMT 基因，GenBank 登录号为JN093023。该cDNA 全长993 bp，具有1 个744 bp 的完整开放阅读框（ORF），编码247 个氨基酸。序列分析表明，DLCCoAOMT 编码的氨基酸序列与其它植物的 CCoAOMT 蛋白有很高的相似性。系统进化树分析显示，龙眼 DLCCoAOMT 与桦木属的CCoAOMT 蛋白亲缘关系较近。利用荧光定量技术进行组织表达模式分析发现，DLCCoAOMT 基因在根、茎、叶中均有表达。总体上表达量在根和茎中较多，叶中较少，随着低温胁迫时间延长，DLCCoAOMT 基因在各组织的表达量也发生变化。原核表达结果表明，DLCCoAOMT 基因在大肠杆菌中获得表达。【结论】从龙眼中克隆到咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶基因，该基因可能参与调控低温胁迫。
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| 关 键 词： | 龙眼 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶 基因克隆 表达分析 原核表达 |
| 收稿时间： | 2011-07-07 |
Molecular Cloning of Longan Caffeoyl-CoA O-methyltransferase (DLCCoAOMT) and Its Expression Analysis |
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| CHEN Hu , HE Xin-hua , LUO Cong , YANG Li-tao , ZHANG Bao-qing , SONG Xiu-peng. Molecular Cloning of Longan Caffeoyl-CoA O-methyltransferase (DLCCoAOMT) and Its Expression Analysis[J]. Scientia Agricultura Sinica, 2012, 45(1): 118-126. DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.01.014 |
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| Authors: | CHEN Hu HE Xin-hua LUO Cong YANG Li-tao ZHANG Bao-qing SONG Xiu-peng |
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| Affiliation: | 1,3 (1College of Agriculture,Guangxi University,Nanning 530004;2Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Laboratory,Guangxi Academy of Agricultural Sciences,Nanning 530007;3State Key Laboratory for Conservation and Utilization of Subtropical Agro-Bioresources,Guangxi University,Nanning 530004) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Dimocarpus longan Lour. caffeoyl CoA 3-O-methyltransferase gene cloning expression analysis prokaryotic expression |
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