大蒜热激转录因子基因AsHSFB1的克隆、亚细胞定位及其表达分析

热激转录因子(HSF)基因是植物热胁迫响应的重要转录调节基因，在植物胁迫应答和其他抗逆反应过程中起着关键作用。为研究大蒜热激反应的分子机制，本研究基于大蒜转录组数据，以徐蒜6号为试验材料，采用同源克隆方法获得编码HSF的AsHSFB1基因。序列分析结果显示，AsHSFB1含有882 bp的开放阅读框，编码293个氨基酸，其蛋白质含有热激转录因子的特征结构域。在进化关系上，AsHSFB1与拟南芥AT4G11660(AtHSFB2B)同源性最高。亚细胞定位结果表明，AsHSFB1蛋白主要定位在细胞核和细胞质上。本研究采用同源重组技术成功构建pCAMBIA1305-AsHSFB1过表达载体，为进一步研究该转录因子基因的功能，培育耐热大蒜品种奠定基础。RT-PCR分析结果表明，不同大蒜品种中，AsHSFB1基因在叶片中相对表达水平均最高，具有组织表达特异性；38℃高温胁迫处理下，徐蒜6号中的AsHSFB1基因相对表达水平在24 h时明显上调；4℃低温胁迫下，徐蒜815和徐蒜6号中AsHSFB1基因相对表达水平的变化趋势相似，均先上升后下降，在处理4 h时相对表达水平达到峰值。