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利用SMART技术构建鸡法氏囊全长cDNA表达文库
引用本文:袁维峰,吴保明,张鑫宇,张泉,孙怀昌. 利用SMART技术构建鸡法氏囊全长cDNA表达文库[J]. 扬州大学学报(农业与生命科学版), 2009, 30(1)
作者姓名:袁维峰  吴保明  张鑫宇  张泉  孙怀昌
作者单位:扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009;扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009
摘    要:为构建鸡法氏囊组织互补DNA(cDNA)文库,从3周龄鸡法氏囊组织提取总RNA,用偶联oligo(dT)磁珠纯化mRNA,用SMART(Switching methanism at 5'end of RNA transcrip)技术合成cDNA第1链,用LD-PCR方法扩增双链cDNA.经Sfi Ⅰ酶切消化后,用CHROMA SPIN-400柱去除400 bp以下小片段,获得的双链cDNA与同样酶切的pMyr表达载体连接,电转化大肠杆菌获得cDNA文库.初始文库容量为2.8×106cfu,重组子比例为100%,插入片段的大小平均为1.2 kb.扩增后文库容量为8×1011cfu·mL-1.所建文库为鸡传染性法氏囊病毒受体基因克隆及功能研究奠定基础.

关 键 词:  法氏囊组织  cDNA表达文库  鸡传染性法氏囊病毒

Full length cDNA expression library construction of bursa of fabricius in chicken by SMART technology
YUAN Wei-feng,WU Bao-ming,ZHANG Xing-yu,ZHANG Quan,SUN Huai-chang. Full length cDNA expression library construction of bursa of fabricius in chicken by SMART technology[J]. Journal of Yangzhou University(Agricultural and Life Science Edition), 2009, 30(1)
Authors:YUAN Wei-feng  WU Bao-ming  ZHANG Xing-yu  ZHANG Quan  SUN Huai-chang
Affiliation:YUAN Wei-feng,WU Bao-ming,ZHANG Xing-yu,ZHANG Quan,SUN Huai-chang (Coll of Vet Med,Yangzhou Univ,Yangzhou 225009,China)
Abstract:
Keywords:chicken  the bursa of Fabricius  cDNA expression library  IBDV  
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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