鸡血管活性肠肽RNA探针制备及其在鸡肠Remak神经的原位杂交反应 |
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作者姓名: | 柳金雄 冯亚玫 张晖 陈秋生 |
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作者单位: | 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095 |
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摘 要: | 应用RT-PCR方法从鸡脑中扩增血管活性肠肽(VIP)基因片段,将其连接于pGM-T easy.分别利用pGM-T easy中T7和SP6启动子及其RNA聚合酶,以线性化的VIP/pGM-T easy为模板转录合成正、反义DIG标记RNA探针.通过原位杂交方法将合成的探针用于探查VIP-mRNA在鸡肠Remak神经(INR)中的分布情况.结果表明,INR的神经元胞体中有VIP-mRNA的转录,且这种神经元数量众多;原位杂交阳性神经元胞体大部分是大型神经元细胞,呈圆形或椭圆形;阳性神经元胞体在INR神经节中呈层状或成群分布.INR的神经纤维呈弱阳性.在节间束也有少量的阳性细胞分布.本研究从基因水平证明INR中有VIP神经元存在.
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关 键 词: | 鸡肠Remak神经 血管活性肠肽(VIP) 原位杂交 RNA探针 |
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