狗牙根SRAP-PCR反应体系优化及引物筛选 |
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作者姓名: | 王志勇 袁学军 刘建秀 郭海林 |
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作者单位: | 南京农业大学园艺学院,江苏,南京210095;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014;江苏省中国科学院植物研究所,江苏,南京,210014 |
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摘 要: | 利用正交设计,从Mg2 、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4种因素3个水平以及不同的模板DNA浓度来优化狗牙根SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了全面筛选。狗牙根SRAP-PCR优化反应体系结果为:2μL 10×buffer4、0 ng模板DNA、Mg2 1.25 mmol/Ld、NTP 260μmol/L、引物0.2μmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U,总体积20μL。运用该结果从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物34对。优化体系的建立及其引物的筛选为今后利用SRAP标记技术进行狗牙根遗传分析、图谱构建、基因定位与种质资源鉴定奠定了技术基础。
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关 键 词: | 狗牙根 SRAP标记 正交试验 体系优化 引物 |
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