| 利用LAMP法快速检测致病性哈维氏弧菌 |
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| 引用本文： | 张静,施慧,谢建军,许文军. 利用LAMP法快速检测致病性哈维氏弧菌[J]. 上海海洋大学学报, 2010, 19(5): 601-607 |
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| 作者姓名： | 张静 施慧 谢建军 许文军 |
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| 作者单位： | 浙江海洋学院, 浙江 舟山 316000;浙江省海洋水产研究所, 浙江 舟山 316100 |
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| 基金项目： | 浙江省科研院所公共科技服务项目 (2008F4003); 浙江省大学生新苗计划项目 (2008R40G2110020); 浙江省科技厅一般科研项目 (2009C32062); 浙江省海洋渔业局海洋与海岛管理项目 (浙海渔计2008-130) |
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| 摘 要： | 从浙江宁波的发病鲈鱼(Lateolabrax japonicus)分离到1株致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi) LY-1。从该菌的DNA样本中成功扩增出大小为873 bp的ToxR基因片段。DNA序列分析表明:该序列与已登录哈维氏弧菌(Vibrio harveyi) ToxR基因同源性为96.57%,与副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、鳗弧菌(V.anguilarum)、创伤弧菌(V.vulnificus)、费氏弧菌(V.fisheri)、溶藻胶弧菌(V.alginolyticus)、霍利斯弧菌(V.hollisae)、拟态弧菌(V.mimicus)、河弧菌(V.fluvialis)的ToxR基因相似性为27.62%~72.49%。选择哈维氏弧菌ToxR基因种内保守区段,设计1套环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术的特异引物,对扩增条件进行优化实验,在65℃孵育45 min的条件下即可完成哈维氏弧菌特异性扩增,成功建立了海水致病菌-哈维氏弧菌的LAMP快速检测方法。结果分析表明:该方法对哈维氏弧菌DNA的最小检出量为1 fg,比PCR法灵敏度高3个数量级。利用LAMP方法快速检测哈维氏弧菌,目前在国内外还未见报道。
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| 关 键 词： | 哈维氏弧菌 ToxR基因 LAMP 快速检测方法 |
| 收稿时间： | 2009-09-11 |
Rapid detection of pathogenic Vibrio harveyi by loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method |
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| ZHANG Jing,SHI Hui,XIE Jian-jun,XU Wen-jun. Rapid detection of pathogenic Vibrio harveyi by loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method[J]. Journal of Shanghai Ocean University, 2010, 19(5): 601-607 |
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| Authors: | ZHANG Jing SHI Hui XIE Jian-jun XU Wen-jun |
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| Affiliation: | Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316000, China;Marine and Fisheries Research Institute of Zhejiang Province, Zhoushan 316100, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio harveyi ToxR LAMP rapid detection |
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