利用晚疫病菌无毒基因瞬时表达技术鉴定马铃薯抗病基因 |
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引用本文: | 周晶,张子莹,路远,田振东,谢从华.利用晚疫病菌无毒基因瞬时表达技术鉴定马铃薯抗病基因[J].中国马铃薯,2014(4):217-224. |
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作者姓名: | 周晶 张子莹 路远 田振东 谢从华 |
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作者单位: | 园艺植物生物学教育部重点实验室;国家蔬菜改良中心华中分中心华中农业大学; |
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基金项目: | 国家“863”项目(2013AA102603);国家自然科学基金项目(31171603);华中农业大学2013年大学生科技创新基金(SRF2013222) |
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摘 要: | 由Phytophthora infestans引起的晚疫病是马铃薯的毁灭性病害。明确现有马铃薯品种或育种材料含有的晚疫病抗病基因,对于抗病育种和合理利用不同抗病基因防治马铃薯晚疫病具有重要意义。根据"基因对基因"学说,马铃薯无毒基因与抗病基因产物互作会产生典型过敏反应(HR)。理论上利用病原菌无毒基因可以鉴定马铃薯是否含有相应抗病基因。本研究尝试利用农杆菌注射技术,在马铃薯叶片中瞬时表达晚疫病菌无毒基因(Avr),根据过敏反应发生情况,进而推断马铃薯品种/育种材料所含相应抗病基因(R)。研究结果显示:适合马铃薯瞬时表达的农杆菌浓度为0.5(OD600),马铃薯材料农杆菌瞬时表达存在明显的基因型和叶龄依赖性,充分展开的幼嫩叶片适合农杆菌瞬时表达。Avr1,Avr2,Avr3a和Avr4在含有相应抗病基因的马铃薯鉴别寄主上瞬时表达能够产生HR,表明无毒基因注射鉴定结果是可靠的。无毒基因注射鉴定结果与抗病基因特异引物PCR扩增结果在不同基因型材料上有时并不一致,反映了这两种方法各有局限性,若能将这两种方法结合使用,则会提高鉴定结果的准确性。
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关 键 词: | 马铃薯 晚疫病 无毒基因 抗病基因 瞬时表达 农杆菌注射 |
Identification of Late Blight Resistance R Genes of Potato by Transient Expressing of Phytophthora infestans Avirulence Genes Using Agro-infiltration |
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