| 猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的原核表达及其产物的细胞毒性 |
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| 引用本文： | 刘丽娜,何启盖,陈焕春,刘正飞,贝为成.猪胸膜肺炎放线杆菌荚膜多糖基因的原核表达及其产物的细胞毒性[J].中国兽医科技,2005,35(10):761-765. |
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| 作者姓名： | 刘丽娜 何启盖 陈焕春 刘正飞 贝为成 |
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| 作者单位： | 华中农业大学动物医学院,湖北武汉430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30200011）;湖北省科技攻关项目（2001AA201802） |
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| 摘 要： | 参考GenBank中猪胸膜肺炎放线杆菌（App）血清2型荚膜多糖基因的序列分别设计了3对特异性引物，通过PCR分别扩增了CpsA、CpsB、CpsC3个基因，获得长约1137、429、1146bp的片段，将其分别克隆到pMD18-T中，经酶切鉴定和序列分析获得了阳性克隆子；再将CpsA、CpsB、CpsC分别插入原核表达载体pGEX-KG后，转化BL21，在IPTG诱导下获得高效表达，经Western-blotting检测证实，表达产物CpsC有生物学活性，CpsA、CpsB无活性；将3种表达产物等量混合，做10倍递进稀释后，与分离出的猪嗜中性粒细胞作用，37℃、50mL／L CO2培养箱中温育4h后加入底物液，测定D492nm值。结果表明，App荚膜多糖对猪嗜中性粒细胞无毒性作用。
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| 关 键 词： | 猪胸膜肺炎放线杆菌 荚膜多糖基因 克隆 表达 细胞毒性试验 |
| 文章编号： | 1000-6419（2005）10-0760-05 |
| 收稿时间： | 2005-04-14 |
Prokaryotic expression of capsular polysaccharide genes of Actinobacillus pleuropneumoniae and cytotoxicity assay of expressed products to porcine neutrophil |
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| LIU Li-na, HE Qi-gai, CHEN Huan-chun, LIU Zheng fei, BEI Wei-cheng.Prokaryotic expression of capsular polysaccharide genes of Actinobacillus pleuropneumoniae and cytotoxicity assay of expressed products to porcine neutrophil[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2005,35(10):761-765. |
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| Authors: | LIU Li-na HE Qi-gai CHEN Huan-chun LIU Zheng fei BEI Wei-cheng |
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| Institution: | College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Actinobacillus pleuropneumoniae capsular polysaccharide gene cloning expression cytotoxicity assay |
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