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| 传染性法氏囊病毒VP_2在酵母细胞内的高效表达及其免疫原性研究 | |
| 引用本文： | 王笑梅,王牟平,高宏雷,付朝阳,曾祥伟,张守发.传染性法氏囊病毒VP_2在酵母细胞内的高效表达及其免疫原性研究[J].中国农业科学,2003,36(4):443-447. |
| 作者姓名： | 王笑梅 王牟平 高宏雷 付朝阳 曾祥伟 张守发 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001 2. 东北农业大学动物医学院,哈尔滨,150030 3. 延边大学农学院,吉林,133400 |
| 基金项目： | 中国-欧盟合作资助项目 (INCO DC :ERBIC18CT980 3 3 0 ) |
| 摘 要： | 应用Pichia酵母表达系统高效表达了传染性法氏囊病毒 (IBDV)VP2 基因片段。首先用OLIGO设计 1对引物P5、P6 ,以插入IBDVVP2 基因的 pUC19为模板 ,扩增出带有终止密码子的 1.5kb片段 ,将此片段正向亚克隆到 pPICZA表达载体上 ,将构建好的载体pPICVP2 用SacI内切酶线性化后 ,转染酵母PichiapastorisGS115细胞 ,经PCR鉴定 ,筛选出 5 0多个重组子。分别用甲醇诱导后 ,经SDS PAGE凝胶电泳、琼脂扩散试验、Dot ELISA检测 ,得到 9个不同程度表达 4 1kuVP2 活性蛋白的阳性重组子。经凝胶薄层扫描仪分析 ,表达蛋白占酵母细胞总蛋白的最高比率为 16 % ,表达量为 0 .6 2 0 8g·L-1。表达产物免疫SPF鸡可诱导产生特异性抗体 ,并能保护鸡抵抗超强毒致死性攻击 ,具有良好的免疫原性。 |
| 关 键 词： | 传染性法氏囊病病毒 VP2 酵母表达 免疫原性 |
| 修稿时间： | 2001年5月10日 |
High-efficiency Expression of the Major Antigen Gene VP2 of Infectious Bursal Disease Virus in Yeast and Rudimentary Immunization Test |
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| WANG Xiao mei ,WANG Mu ping ,GAO Hong lei ,FU Zhao yang ,ZENG Xiang wei ,ZHANG Shou fa.High-efficiency Expression of the Major Antigen Gene VP2 of Infectious Bursal Disease Virus in Yeast and Rudimentary Immunization Test[J].Scientia Agricultura Sinica,2003,36(4):443-447. | |
| Authors: | WANG Xiao mei WANG Mu ping GAO Hong lei FU Zhao yang ZENG Xiang wei ZHANG Shou fa |
| Institution: | WANG Xiao mei 1,WANG Mu ping 1,GAO Hong lei 1,FU Zhao yang 1,ZENG Xiang wei 2,ZHANG Shou fa 3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | IBDV VP 2 Yeast expression Rudimentary immunization |
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