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芸芥(Eruca.sativa Mill)总DNA提取方法及RAPD扩增体系研究
引用本文:范惠玲,孙万仓,孟亚雄. 芸芥(Eruca.sativa Mill)总DNA提取方法及RAPD扩增体系研究[J]. 西北农业学报, 2007, 16(1): 17-21
作者姓名:范惠玲  孙万仓  孟亚雄
作者单位:1. 甘肃农业大学农学院,兰州,730070
2. 甘肃省农业科学院经济作物研究所,兰州,730070
基金项目:甘肃省自然科学基金自助项目
摘    要:以芸芥9370为材料,在SDS法的基础上,通过改变离心时间,操作步骤,建立了一种较快速提取芸芥基因组DNA的方法。使用美国伯乐公司生产的Mycycler TM thermal cycler扩增仪,对影响RAPD扩增的因素进行了比较研究,确定了模板、10×buffer(主要含Mg2 )、、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶的适宜量和最佳的循环次数。试验结果表明在25μL体系中使用18.5μL ddH2O,2μL 10×buffer(主要含Mg2 ),2μLdNTPs,1μL引物,0.5μL TaqDNA聚合酶,1μL模板;反应条件为94℃预变性4 min,然后进行94℃50 s,38℃退火1 min 20 s,72℃延伸2 min,40个循环后,再在72℃延伸10 min,芸芥RAPD扩增效果较好。

关 键 词:芸芥  影响因素
文章编号:1004-1389(2007)01-0017-05
收稿时间:2006-03-21
修稿时间:2006-03-21

Studies on the Method of Genomic DNA Extraction and the System of RAPD Reaction for Eruca sativa Mill
FAN Hui-ling,SUN Wan-cang and MENG Ya-xiong. Studies on the Method of Genomic DNA Extraction and the System of RAPD Reaction for Eruca sativa Mill[J]. Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica, 2007, 16(1): 17-21
Authors:FAN Hui-ling  SUN Wan-cang  MENG Ya-xiong
Affiliation:College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China;Gansu Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730070, China;College of Agronomy, Gansu Agricultural University, Lanzhou 730070, China
Abstract:
Keywords:SDS  RAPD
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