牦牛源产气荚膜梭菌β2基因的原核表达及生物信息学分析 |
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作者姓名: | 索朗斯珠 黄家旗 罗润波 吴丹 蔡重振 李宇鹏 叶丽君 |
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作者单位: | 西藏农牧学院动物科学院 |
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基金项目: | 财政部和农业农村部:国家现代农业产业技术体系(CARS-37); |
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摘 要: | 为了原核表达一株牦牛源产气荚膜梭菌Qinghai-1的β2基因及了解其编码蛋白的生物信息。首先利用PCR扩增技术、基因克隆技术构建原核表达质粒并通过高通量测序、双酶切技术、SDS-PAGE检测和Western blotting方法对表达情况进行鉴定,其次利用生物信息学分析的方法对β2毒素蛋白的一级结构、二级结构、蛋白特殊区域、三级结构及B细胞线性抗原表位等多方面进行预测分析。原核表达结果显示:牦牛源产气荚膜梭菌β2基因在温度为37℃,IPTG浓度为1.5 mmoL/L,培养时间为8 h~10 h的条件下可得到大小约为28KD的可溶于细胞质的不含信号肽的目的蛋白。生物信息学分析结果显示:牦牛源产气荚膜梭菌β2基因大小为798 bp,共编码265个氨基酸,与印度的产气荚膜梭(FR687302.1)的β2毒素基因相似性最高;其分子式为C1392H2136N356O418S11,分子量为30.9 ku,pI=6.04,负电荷(Asp+Glu)残基总数36个,正电荷(Arg+Lys)残基...
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关 键 词: | 牦牛 产气荚膜梭菌 β2基因 原核表达 生物信息学分析 |
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