| 小鼠蛋白激酶CK2β亚基cDNA的克隆与序列分析 |
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| 引用本文： | 刘新光,彭海艳,陈小文,郑克勤,梁念慈. 小鼠蛋白激酶CK2β亚基cDNA的克隆与序列分析[J]. 湛江医学院学报, 2002, 20(1): 1-4 |
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| 作者姓名： | 刘新光 彭海艳 陈小文 郑克勤 梁念慈 |
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| 作者单位： | [1]广东医学院生物化学和分子生物学研究所，广东湛江524023 [2]广东医学院96级医学检验系学生，广东湛江524023 [3]广东医学院医学遗传研究室，广东湛江524023 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金 (0 1176 6 )，湛江市科委科技计划项目，广东医学院标志性成果扶持项目 (XK0 0 0 2 ) |
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| 摘 要： | 目的：构建小鼠蛋白激酶CK2β亚基cDNA重组表达质粒，以便深入进行CK2结构与功能的研究。方法：通过反转录PCR从NIH3T3小鼠成纤维细胞中获得小鼠蛋白激酶CK2β亚基编码区cDNA，PCR扩增酶为高保真DNA聚合酶。将NdeⅠ/HindⅢ彻底双酶切PCR产物定向连接到牛小肠碱性磷酸酶去5′端磷酸的同样彻底NdeⅠ/HindⅢ双酶切的表达载体pT7—7中，转化感受态大肠杆菌DH5α获得转化子，用0．8％琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化予，将阳性克隆进行单和双酶切分析鉴定。随机挑选两个阳性克隆进行DNA测序。结果：转化子的阳性筛选率为100％，限制性酶切分析结果表明插入片段和重组质拉的大小与理论推测值相符。DNA测序结果表明：两个重组小鼠CK2β亚基克隆中的插入片段序列均与两种已报道的小鼠CK2β亚基cDNA编码区序列分别存在一个碱基差异，但我们报道的这2个差异碱基与大鼠、兔、猪和人CK2β亚基cDNA的编码区相应碱基序列一致。结论：本实验克隆的小鼠蛋白温酶CK2β亚基cDNA编码区序列可能是正确的序列。
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| 关 键 词： | 小鼠 蛋白激酶 CK2β亚基 cDNA 克隆 序列分析 |
| 文章编号： | 1005-4057(2002)-01-0001-04 |
| 修稿时间： | 2001-07-27 |
Cloning and sequencing of recombinant cDNA encoding mouse protein kinase CK2 β subunit |
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| LIU Xin-guang ,PENG Hai-yan ,CHEN Xiao-wen,et al. Cloning and sequencing of recombinant cDNA encoding mouse protein kinase CK2 β subunit[J]. Journal of Guangdong Medical College, 2002, 20(1): 1-4 |
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| Authors: | LIU Xin-guang PENG Hai-yan CHEN Xiao-wen et al |
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| Affiliation: | LIU Xin-guang 1,PENG Hai-yan 2,CHEN Xiao-wen,et al |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | regulatory subunit/protein kinase CK2/mouse expression vector pT7-7 molecular cloning DNA sequence analysis |
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