鸭腺病毒3型荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 刘孟啸.鸭腺病毒3型荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用[J].中国兽药杂志,2023,57(11):8-15. |
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作者姓名: | 刘孟啸 |
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作者单位: | 河北工程大学生命科学与食品工程学院 |
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基金项目: | “十四五”国家重点研发计划项目子课题“重要人兽共患病恒温快检测试剂盒的研制和注册”(2022YFC2304002-3); |
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摘 要: | 鸭腺病毒3型(Duck adenovirus type 3,DAdV-3)是我国近年来新发的禽腺病毒,致病力较强,已经严重影响到鸭养殖业。为实现对DAdV-3的快速检测,以DAdV-3的Hexon基因为靶基因,设计特异性重组酶聚合酶扩增(Recombinase polymerase amplification, RPA)引物和探针,并构建重组标准质粒命名为DAdV-H-18T,优化RPA反应条件后,建立DAdV-3的荧光RPA恒温快速检测方法。结果显示,该检测方法最佳反应条件为38℃、18 min;特异性强,与其他常见鸭病病原如鸭肝炎病毒、鸭坦不苏病毒等均无交叉反应。对重组质粒DAdV-H-18T的最低检测限为1 copy/μL;采用建立的RPA检测方法和qPCR对55份鸭组织临床样本进行检测,阳性率分别为65.4%、50.9%,检测符合率为92.7%。研究建立的DAdV-3荧光RPA方法,检测速度快,敏感性高,特异性强,为该病临床快速检测提供了有力工具。
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关 键 词: | DAdV-3 Hexon基因 RPA 恒温快速检测 |
收稿时间: | 2023/7/13 0:00:00 |
修稿时间: | 2023/10/19 0:00:00 |
Rapid Detection of Duck Adenovirus Type 3 Based on Isothermal Recombinase Polymerase Amplification Assay |
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Institution: | School of Life Science and Food Engineering, Hebei University of Engineering |
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Abstract: | |
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Keywords: | Dadv-3 Hexon gene RPA constant temperature rapid detection |
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