| GFP标记短小芽孢杆菌LYMC-3在马尾松体内的定殖 |
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| 引用本文： | 李亮亮,谈家金,陈凤毛. GFP标记短小芽孢杆菌LYMC-3在马尾松体内的定殖[J]. 华中农业大学学报, 2016, 35(6): 68-73 |
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| 作者姓名： | 李亮亮 谈家金 陈凤毛 |
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| 作者单位： | 南京林业大学林学院/南方现代林业协同创新中心,南京,210037 |
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| 基金项目： | 江苏省高校自然科学研究重大项目（14KJA220002）; 江苏省生物学优势学科（PAPD）项目 |
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| 摘 要： | 为研究松材线虫拮抗细菌短小芽孢杆菌LYMC-3的内生性及其在马尾松体内的定殖规律,采用扫描电子显微镜(SEM)观察菌株在马尾松组培苗体内的定殖,并采用高渗透法将质粒pGFP78转入菌株LYMC-3,对其进行绿色荧光蛋白(GFP)标记,同时测定标记菌株的遗传稳定性.在此基础上,以GFP标记和抗性标记作为示踪手段,将标记菌株接种到2年生马尾松盆栽实生苗的根部,借助激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)和稀释涂板的方法,对马尾松根部、茎部的标记菌株进行定期回收检测.结果显示,通过SEM成功观察到菌株LYMC-3在马尾松体内的定殖,并成功获得LYMC-3菌株荧光表达强烈且遗传稳定的转化子,经过连续8次的稀释培养,其遗传稳定性为96.8％.GFP标记菌株在接种马尾松根部后的第4天,根部、茎部都能回收到大量标记菌株的存在,随后呈持续下降的趋势,且根部的下降速度快于茎部.接种40 d后,根部回收标记菌株数量为0.3×102cfu/g,茎部回收标记菌株数量为0.8×102 cfu/g.以上结果表明短小芽孢杆菌LYMC-3具有内生性,能在马尾松体内良好地定殖和传导.
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| 关 键 词： | 短小芽孢杆菌 马尾松 绿色荧光蛋白 遗传稳定性 定殖 |
| 收稿时间： | 2016-04-08 |
Colonization of GFP-tagged Bacillus pumilus strain LYMC-3 in masson pine |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus pumilus masson pine green fluorescent protein genetic stability colonization |
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