| PCV2b衣壳蛋白C端连接不同B细胞表位对其免疫原性的影响 |
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| 引用本文： | 刘晴坤,冯华,任春晓,魏蔷,刘运超,张改平.PCV2b衣壳蛋白C端连接不同B细胞表位对其免疫原性的影响[J].华北农学报,2020,35(3):233-238. |
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| 作者姓名： | 刘晴坤 冯华 任春晓 魏蔷 刘运超 张改平 |
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| 作者单位： | 河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002,河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002,河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002,河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002,河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002,河南农业大学 生命科学学院,河南 郑州 450002;河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002;郑州大学 生命科学学院,河南 郑州 450001 |
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| 基金项目： | 河南省重点研发与推广专项 |
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| 摘 要： | 为了研制廉价高效的猪圆环病毒2型(PCV2)亚单位疫苗,根据大肠杆菌密码子的偏好性合成PCV2b(GenBank:AY969004.1)cap基因全序列,利用PCR技术,分别将PCV2的2个B细胞表位(~(226)LKDPPLNP~(233)和~(195)HVGLGTAF~(202))以单独和串联的方式连接到Cap的C端,成功构建至pE-SUMO表达载体,将3个重组载体转化表达菌株BL21(DE3)后诱导表达,经SDS-PAGE分析和Western Blotting鉴定,3种重组蛋白均以可溶形式表达且表达正确。对3种重组蛋白分别进行镍柱亲和层析纯化,再用SUMO蛋白酶除去融合标签,获得无标签的Cap-e1、Cap-e2和Cap-e12蛋白,并分别与相应的弗氏佐剂等体积乳化,将20只6周龄大小的雌性Balb/c小鼠随机分成5组,分别免疫3种重组蛋白,同时设置疫苗组和PBS组作为对照组,并进行免疫评价,比较C末端连接的不同B细胞表位对Cap免疫原性的影响。抗体检测结果表明,除第2周外,各试验组的抗体水平均显著高于PBS组,且连接2个表位的Cap-e12蛋白产生的抗体水平高于只连接1个表位的蛋白(Cap-e1、Cap-e2),而在第6周时,Cap-e12蛋白抗体水平与疫苗组无显著差异。综上Cap的免疫原性与连接表位数量有关,连接2个表位后能显著提高Cap的免疫原性。
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| 关 键 词： | 猪圆环2型病毒 小分子泛素相关修饰物 衣壳蛋白 B细胞表位 免疫原性 |
The Impact of Different B Cell Epitopes on PCV2 Cap's Immunogenicity after Conjugated at C-terminal of Cap |
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| LIU Qingkun,FENG Hua,REN Chunxiao,WEI Qiang,LIU Yunchao,ZHANG Gaiping.The Impact of Different B Cell Epitopes on PCV2 Cap's Immunogenicity after Conjugated at C-terminal of Cap[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2020,35(3):233-238. |
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| Authors: | LIU Qingkun FENG Hua REN Chunxiao WEI Qiang LIU Yunchao ZHANG Gaiping |
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