| 广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌3种毒力基因检测及tlh基因的蛋白表达 |
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| 作者姓名： | 刘杰 贺晓晨 黎姗梅 黄艳华 张振豪 黄德生 杨廷雅 吴伟锋 梁静真 黄钧 |
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| 作者单位： | 广西财经学院,广西南宁530003;广西大学动物科学技术学院 /广西水生动物病害诊断实验室,广西南宁,530005,广西大学动物科学技术学院 /广西水生动物病害诊断实验室,广西南宁,530005,广西水产技术推广站,广西南宁,530022,钦州市水产技术推广站,广西钦州,535000,防城港市港口区渔业技术推广站,广西防城港,538002,合浦县水产技术推广站,广西北海,536100,广西大学动物科学技术学院 /广西水生动物病害诊断实验室,广西南宁,530005,合浦县水产技术推广站,广西北海,536100,广西大学动物科学技术学院 /广西水生动物病害诊断实验室,广西南宁,530005,广西大学动物科学技术学院 /广西水生动物病害诊断实验室,广西南宁,530005 |
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| 摘 要： | 采用PCR技术检测分离自广西钦州、北海和防城港3市凡纳滨对虾样品中的67株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)3种毒力基因tdh、trh和tlh的携带情况,并将tlh基因进行原核表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定分析。结果显示,67株副溶血弧菌均未扩增出tdh和trh基因,而tlh基因检出率为100.0%,所检副溶血弧菌的毒力基因型为tdh~-trh~-tlh~+。成功构建了原核表达质粒pET-28a-tlh,将其转化至大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测得到大小约为53 kDa的产物,与预测值相符。经Western blotting鉴定,该重组表达产物能与抗6×His标签的单克隆抗体发生特异性反应。
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| 关 键 词： | 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) tdh基因 trh基因 tlh基因 蛋白表达 |
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