| 受多逆境诱导表达的GhWRKY64基因启动子克隆与功能分析 |
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| 引用本文： | 杜皓,丁林云,何曼林,蔡彩平,郭旺珍. 受多逆境诱导表达的GhWRKY64基因启动子克隆与功能分析[J]. 作物学报, 2015, 41(4): 593-600 |
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| 作者姓名： | 杜皓 丁林云 何曼林 蔡彩平 郭旺珍 |
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| 作者单位： | 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室 / 教育部杂交棉创制工程研究中心, 江苏南京210095 |
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| 基金项目： | 国家转基因生物新品种培育重大专项(2011ZX08005-004);江苏省农业科技自主创新资金项目[cx(14)2065];江苏省现代作物生产协同创新中心(JCIC-MCP)资助 |
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| 摘 要： | WRKY蛋白属于锌指型转录调控因子,参与植物生长发育及耐逆响应。以陆地棉遗传标准系TM-1为材料,克隆Gh WRKY64(KF031101)基因上游1064 bp的启动子序列,并对其调控元件及功能进行分析。生物信息学分析表明,该区域含18个组织器官表达及诱导表达关键元件,分别为6个ROOTMOTIFTAPOX1根特异调控元件,4个CACTFTPPCA1叶肉特异性调控元件、4个OSE2ROOTNODULE病菌诱导元件、2个GTIGMSCAM4盐调控元件和2个W-box胁迫应答响应元件。将该启动子与GUS基因融合,构建p BIW64:GUS植物表达载体,通过农杆菌介导叶盘转化法获得12个转基因烟草株系。选择GUS表达量最高的p BIW64-5进行转基因不同组织器官表达及诱导表达分析。GUS组织化学染色显示,苗期的转基因烟草植株在叶和根部均具有GUS活性,开花期在转基因烟草植株根、叶及叶柄均检测到GUS活性,特别在转基因烟草的根及根尖部分染色更深,在茎和花组织上未检测到GUS活性。对该转基因烟草幼苗进行黄萎病菌诱导处理,诱导48 h后,转基因烟草幼苗根和叶片的GUS染色比未诱导处理的对照明显加深。结果表明,Gh WRKY64上游1064 bp长度的DNA序列,具有启动子的相关顺式作用元件,且为病原菌诱导型启动子。该启动子可为开展棉花抗黄萎病转基因研究提供调控元件。
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| 关 键 词： | GhWRKY64启动子 逆境胁迫 转基因烟草 调控元件 GUS活性 |
| 收稿时间： | 2014-10-17 |
Cloning and Functional Identification of Promoter Region of GhWRKY64Induced by Multi-stresses in Cotton (Gossypium hirsutum) |
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| DU Hao;DING Lin-Yun;HE Man-Lin;CAI Cai-Ping;GUO Wang-Zhen. Cloning and Functional Identification of Promoter Region of GhWRKY64Induced by Multi-stresses in Cotton (Gossypium hirsutum)[J]. Acta Agronomica Sinica, 2015, 41(4): 593-600 |
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| Authors: | DU Hao DING Lin-Yun HE Man-Lin CAI Cai-Ping GUO Wang-Zhen |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Crop Genetics & Germplasm Enhancement, Hybrid Cotton Research & Development Engineering Research Center, Ministry of Education, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GhWRKY64promoter Abiotic and biotic stress Transgenic tobacco Regulatory elements GUS activity |
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