| 裸大麦PKABA1基因实时荧光定量PCR方法的建立 |
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| 作者姓名： | 吴昆仑 邓晓青 姚晓华 |
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| 作者单位： | 青海省农林科学院/青海大学农林科学院/青海省高原作物种质资源创新与利用国家重点实验室培育基地/青海省裸大麦遗传育种重点实验室,青海西宁,810016 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系建设专项，国家"948"计划 |
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| 摘 要： | 根据GenBank上小麦(M94726)、大麦(AB058924)和黑麦(DQ295068)的蛋白激酶外显子3的编码基因的同源序列比对,设计基因PKABA1的引物,建立了用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测裸大麦PKABA1基因在不同低温处理时间下mRNA表达量的方法.以样本循环数为纵坐标、以稀释倍数的对数为横坐标建立标准曲线,其相关系数(r2)达到了0.996,扩增效率99％,熔解曲线分析结果显示产物为特异的单峰,退火温度为(80.5±0.5)℃.结果表明,裸大麦PKABA1基因在不同低温处理时间下的表达量稳定,其实时荧光定量PCR法扩增效率高、特异性强、线性范围广、检测周期短,为PKABA1基因作为内参基因进行裸大麦功能基因表达的定量分析奠定了基础.
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| 关 键 词： | 裸大麦 实时荧光定量 PCR扩增 标准曲线 PKABA1基因 |
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