检测组织石蜡切片中猪圆环病毒2型间接原位PCR方法的建立与评估

利用PCR的高灵敏度和原位杂交（ISH）的细胞定位能力,建立了一种间接原位PCR（ISPCR）方法用来检测经福尔马林固定的腹股沟淋巴结的石蜡切片中的猪圆环病毒2型（PCV2）的分布,这些腹股沟淋巴结来自于携带猪圆环病毒2型的临床健康猪及患有断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的仔猪。间接ISPCR与其他几种常规PCV2诊断方法敏感度比较结果显示：套式PCR方法最为敏感,其次是间接ISPCR、常规PCR、ISH与免疫组织化学（IHC）染色方法。尽管间接ISPCR、ISH和IHC染色方法均能显示出相似的PCV2信号分布图,但是间接ISPCR可以显示出先前用常规ISH或ICH染色方法未能显示出来的PCV2信号,尤其在携带PCV2的临床健康猪的生发中心细胞中。而且6种不同的PCV2信号表达模式与相关淋巴组织病变可被分级用来描述组织形态学变化和病毒感染。研究结果表明：间接ISPCR是一种效果较为显著的基于细胞的诊断工具,它具有在福尔马林中固定并经石蜡包埋的组织切片中诊断PCV2的特异性,它将是深入研究PCV2发病机理的有效工具。