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稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法
引用本文:刘同宝,卢建平,林福呈.稻瘟病菌附着胞差异表达基因文库的构建方法[J].植物病理学报,2006,36(2):129-134.
作者姓名:刘同宝  卢建平  林福呈
作者单位:1. 浙江大学生命科学学院, 杭州 310029;2. 浙江大学生物技术研究所, 杭州 310029
基金项目:中国科学院资助项目;国家科技攻关项目
摘    要: 利用抑制性差减杂交方法构建了稻瘟病菌分生孢子接种24h所形成的附着胞差异表达基因文库。采用复印胶片诱导稻瘟病菌附着胞形成,在孢子浓度为1.0×106个/mL时,附着胞的形成率达到96.5%。分别提取附着胞、菌丝和分生孢子RNA,反转录成cDNA并经Alu Ⅰ酶切、接头连接后,以附着胞cDNA片段为tester,菌丝及分生孢子cDNA为driver进行抑制性差减杂交,构建成差减文库。从文库中分离获得142个基因片段,通过RT-PCR方法鉴定其中的71个为差异表达基因,证实文库高效可靠。构建优质的稻瘟病菌附着胞差异表达基因差减文库,为深入了解附着胞形成过程中基因的表达及功能奠定了基础。

关 键 词:稻瘟病菌  附着胞  抑制性差减杂交  
文章编号:0412-0914(2006)02-0129-06
修稿时间:2005年3月24日

Construction of subtraction libraries in association with appressorium formation expressed genes of Magnaporthe grisea
LIU Tong-bao,LU Jian-ping,LIN Fu-cheng.Construction of subtraction libraries in association with appressorium formation expressed genes of Magnaporthe grisea[J].Acta Phytopathologica Sinica,2006,36(2):129-134.
Authors:LIU Tong-bao  LU Jian-ping  LIN Fu-cheng
Institution:1. College of Life Sciences, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China;2. Biotechnology Institute, Zhejiang University, Hangzhou 310029, China
Abstract:
Keywords:Magnaporthe grisea  appressorium  suppression subtractive hybridization
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