| 应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体 |
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| 引用本文： | 邓晨,于佩峰,张鑫,王梦云,吕岩,艾永兴.应用Intein融合的鸡IL-2蛋白制备多克隆抗体[J].吉林农业大学学报,2015(3):368-374. |
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| 作者姓名： | 邓晨 于佩峰 张鑫 王梦云 吕岩 艾永兴 |
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| 作者单位： | 吉林大学动物科学学院 |
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| 摘 要： | 研究Intein标签与目的蛋白chIL-2融合作为抗原,进行高效价兔抗chIL-2蛋白多克隆抗体的制备,将去除去了N-端信号肽的chIL-2基因(366 bp)克隆连接到p TYB1原核表达载体,将chIL-2基因与1 362 bp的Intein基因融合在同1开放阅读框内,编码分子量约为71 ku的chIL-2-Intein融合蛋白。诱导表达chIL-2-Intein融合蛋白,应用Chitin-Sepharose亲和层析进行融合蛋白纯化。用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白免疫大白兔制备多克隆抗体。应用昆虫细胞表达系统纯化出的chIL-2-6His蛋白作为抗原,包被ELISA板用于抗体效价的检测,Western Blot分析抗体特异性。结果表明:应用纯化的chIL-2-Intein融合蛋白成功制备特异性chIL-2抗体,效价高达4 096 000,且该抗体也能用于Intein标签蛋白的检测。
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| 关 键 词： | 内肽酶 鸡白介素-2 pTYB1 多克隆抗体 |
Generation and Characterization of Polyclonal Antibodies against Chicken IL-2 Using IL-2-Intein Fusion Protein |
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