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紫红线茄转基因体系的优化及基因SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化
引用本文:包崇来,杜黎明,胡天华,朱琴妹,胡海娇,毛伟海.紫红线茄转基因体系的优化及基因SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化[J].园艺学报,2014,41(6):1105-1114.
作者姓名:包崇来  杜黎明  胡天华  朱琴妹  胡海娇  毛伟海
作者单位:(浙江省农业科学院蔬菜研究所,杭州 310021)
摘    要:建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法,以获得茄子SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI 35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体。含有2 mg · L-1吲哚乙酸,0.5 mg · L-1玉米素,25 mg · L-1卡那霉素和500 mg · L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系。RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除。

关 键 词:茄子  转基因  RNA干涉  农杆菌  
收稿时间:2014-02-13

Optimization of the Transgenic System and Genetic Transformation of SmARF8 Gene RNAi Vector in Red-purple Long Eggplant
BAO Chong-Lai,DU Li-Ming,HU Tian-Hua,ZHU Qin-Mei,HU Hai-Jiao,MAO Wei-Hai.Optimization of the Transgenic System and Genetic Transformation of SmARF8 Gene RNAi Vector in Red-purple Long Eggplant[J].Acta Horticulturae Sinica,2014,41(6):1105-1114.
Authors:BAO Chong-Lai  DU Li-Ming  HU Tian-Hua  ZHU Qin-Mei  HU Hai-Jiao  MAO Wei-Hai
Institution:(The Institute of Vegetable,Zhejiang Academy of Agricultural Sciences,Hangzhou 310021,China)
Abstract:
Keywords:eggplant  genetic transformation  RNA interference  Agrobacterium tumefaciens Agrobacterium tumefaciens
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