紫山药花青素调控基因DaF3H的克隆及表达分析

 以富含花青素的紫山药‘蓣引紫006’为材料，克隆得到花青素生物合成途径中关键酶基因DaF3H（KF561995），其序列全长为1 325 bp，最大开放阅读框为1 089 bp，编码362个氨基酸。DaF3H蛋白属于水溶性的胞质不稳定蛋白，无跨膜区和信号肽结构，为α–酮戊二酸和二价铁离子依赖型的加氧酶家族2OG-Fe（Ⅱ）Oxygenase superfamily]。氨基酸序列与胡桃（ACR47976）、琴叶拟南芥（CAC26921）相似性最高，达到80%。DaF3H在山药幼叶中表达量最高，在成熟叶片和茎中几乎不表达。茎叶和块茎中花青素积累量增速与DaF3H表达密切相关。运用接头PCR法对DaF3H的启动子序列进行了克隆，元件预测显示该序列中存在GT-1光调控元件以及生长素、金属离子、MYB-bZIP-MYC等元件的结合位点，叶片遮光处理试验表明，DaF3H受光调节。