结球甘蓝叶片卷曲相关7 个同源异型盒基因的克隆与表达分析

 以结球甘蓝（Brassica oleracea L.）‘519’品系为试材，通过结球期茎尖和叶片以及莲座期 茎尖和叶片的转录组对比分析，筛选出4 个显著差异表达HB 类基因，分别为BoHAT2、BoHB12、BoHB7 和BoHB27。进一步对上述4 个基因以及调控拟南芥（Arabidopsis thaliana）叶片卷曲但在结球甘蓝转录 组中未检测到表达差异的基因BoPHB、BoPHV 和BoREV 进行了同源克隆。序列分析表明上述7 个基因 都含有同源异型域（homeodomain，HD），具有同源异型盒（homeobox，HB）蛋白家族的典型结构特征。 BlastP（蛋白序列与蛋白库做比对）表明它们与拟南芥的同源蛋白相似性高，来自结球甘蓝的BoHAT2、 BoHB12、BoHB7、BoHB27、BoPHB、BoPHV、BoREV 与拟南芥中的HAT2、ATHB12 、ATHB 7、ATHB27、 PHB、PHV、REV 蛋白同源，同源性分别为86%、80%、79%、60%、94%、95%和96%。BlastP 比对和 进化树分析结果表明，BoHAT2 属于HD-ZipⅡ类，BoHB12 和BoHB7 属于HD-ZipⅠ类，BoHB27 属于 ZF-HD，BoPHB、BoPHV 和BoREV 属于HD-Zip Ⅲ类。BoHAT2、BoHB12、BoHB7、BoHB27、BoPHB、 BoPHV、BoREV 在结球甘蓝莲座期到结球期的茎尖和叶片中均有表达，BoHB12 和BoHB7 在结球期叶片 中表达量显著增高，分别是莲座期叶片的38.1 倍和6.2 倍，其余基因表达量差异不明显，表明BoHB12 和 BoHB7 可能是结球甘蓝球叶自然卷曲过程中的主效调控基因。

Molecular Clonging and Expression Analysis of Seven Homebox Genes from Brassica oleracea