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三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备
引用本文:唐秀山,王磊,廖定为,蒋一男,夏春.三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备[J].中国农业大学学报,2007,12(5):5-9.
作者姓名:唐秀山  王磊  廖定为  蒋一男  夏春
作者单位:中国农业大学,动物医学院,北京,100094
摘    要:为了获得鸡CD8α/β蛋白及其多克隆抗体,进一步研究其结构与功能,本实验从三黄鸡cDNA文库中克隆了其CD8α/β胞外区片段,构建了pQE30/ChCD8α/β原核表达系统,并经诱导表达、亲和层析纯化,获得了纯化的重组蛋白(rChCD8α/β),然后用rChCD8α/β分别免疫Balb/c小鼠制备了其多克隆抗体。结果表明:本实验克隆的ChCD8α长483 bp、编码161个氨基酸、可在E.coliJM109中高效表达,蛋白质分子质量为24.0 ku,表达量占菌体蛋白量的25.0%,由该蛋白质所制备的多克隆抗体抗rChCD8α的ELISA效价为1∶1 024 000;另外,克隆的ChCD8β长447 bp,编码149个氨基酸,蛋白质的分子质量为18.5 ku,表达量占菌体蛋白量的20.0%,抗rChCD8β多克隆抗体ELISA效价为1∶64 000。本实验所得鸡CD8α/β的多克隆抗体将用于四聚体研究。

关 键 词:  CD8α  CD8β  原核表达  多克隆抗体
文章编号:1007-4333(2007)05-0005-01
修稿时间:2007-01-17

Cloning, expression and production of polyclonal antibodies in extracellular regions of chicken CD8α/β
Tang Xiushan,Wang Lei,Liao Dingwei,Jiang Yinan,Xia Chun.Cloning, expression and production of polyclonal antibodies in extracellular regions of chicken CD8α/β[J].Journal of China Agricultural University,2007,12(5):5-9.
Authors:Tang Xiushan  Wang Lei  Liao Dingwei  Jiang Yinan  Xia Chun
Institution:College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100094, China
Abstract:
Keywords:
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