| 应用Cre-loxP系统构建伪狂犬病病毒gE/TK双缺失株 |
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| 引用本文： | 梁苑燕,胡艳芬,张小荣,陈素娟,彭大新,刘秀梵. 应用Cre-loxP系统构建伪狂犬病病毒gE/TK双缺失株[J]. 畜牧兽医学报, 2012, 43(11) |
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| 作者姓名： | 梁苑燕 胡艳芬 张小荣 陈素娟 彭大新 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 江苏省青蓝工程项目，教育部"长江学者和创新团队发展计划"创新团队项目，江苏高校优势学科建设工程资助项目 |
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| 摘 要： | 为了构建无报告基因的猪伪狂犬病病毒(PRV)gE/TK双缺失株,以PRV-JSZ株为亲本毒株,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,先构建出带有loxP位点的rPRV-gE-/GFP,通过Cre重组酶处理后,获得剔除EGFP的gE单缺失株rPRV-gE ;再以rPRV-gE为母本,以相同方法构建gE/TK双缺失株rPRV-gE/TK.荧光检测和PCR结果显示成功构建了gE单缺失株和gE/TK双缺失株 ;病毒生长曲线测定可见rPRv-gE在PK15细胞上的增殖速度与野生株相似,而rPRV-gE/TK较为缓慢 ;rPRV-gE/TK对小鼠的半数致死量大于1×105 TCID50,显著高于rPRV-gE和野生株 ;缺失株免疫小鼠强毒攻击后能提供80％的保护.这些结果表明以Cre/loxP系统可重复使用构建伪狂犬病病毒多基因缺失株,为研制伪狂犬病病毒基因缺失苗和载体疫苗提供了快速筛选的技术平台.
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| 关 键 词： | 伪狂犬病毒 gE基因 TK基因 重组病毒 |
Construction of a gE and TK Double Genes Deletion Mutant of Pseudorabies Virus by Cre-loxP System |
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| LIANG Yuan-yan , HU Yan-fen , ZHANG Xiao-rong , CHEN Su-juan , PENG Da-xin , LIU Xiu-fan. Construction of a gE and TK Double Genes Deletion Mutant of Pseudorabies Virus by Cre-loxP System[J]. Chinese Journal of Animal and Veterinary Sciences, 2012, 43(11) |
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| Authors: | LIANG Yuan-yan HU Yan-fen ZHANG Xiao-rong CHEN Su-juan PENG Da-xin LIU Xiu-fan |
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