| 伪狂犬病病毒TK-/gI-株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达 |
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| 引用本文： | 袁子国,张秀香,刘全,高胜岩,徐慧娟,张守峰,刘晔,扈荣良.伪狂犬病病毒TK-/gI-株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达[J].中国兽医学报,2008,28(4). |
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| 作者姓名： | 袁子国 张秀香 刘全 高胜岩 徐慧娟 张守峰 刘晔 扈荣良 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 伪狂犬病病毒TK-/gI-株基因组经AscⅠ酶切获得含PK基因的8.7 kb片段,将此片段克隆入pPolyⅡ载体的AscⅠ位点,获得中间载体P8-AA,将LacZ表达盒插入其SphⅠ/NdeⅠ位点,构建重组转移载体P8AA-lacZ,将其与伪狂犬病病毒TK-/gI-株基因组共转染PK-15细胞,细胞出现病变后通过覆盖含有X-gal的营养琼脂进行蓝白斑筛选,通过蚀斑克隆方法分离到重组体PRV(rPRV),且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-半乳糖苷酶活性.通过对重组病毒PRV-LacZ和亲本株TK-/gI-株TCID50的试验表明,PK基因的缺失对病毒增殖无影响.
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| 关 键 词： | 伪狂犬病病毒 胸苷激酶基因 转移载体 LacZ基因 伪狂犬病 病毒 基因表达 转移载体 LacZ Construction expression vector transfer pseudorabies virus coli 影响 增殖 失对 试验 亲本株 酶活性 半乳糖苷 稳定 连续传代 |
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