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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库的构建及对小鼠的免疫保护作用研究
引用本文:刘慧芳,周媛媛,刘思国,宫强,王勇,刘建东,王春来,常月红,迟磊,赵昆,云孟克. 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌基因组表达文库的构建及对小鼠的免疫保护作用研究[J]. 中国预防兽医学报, 2008, 30(2): 153-156
作者姓名:刘慧芳  周媛媛  刘思国  宫强  王勇  刘建东  王春来  常月红  迟磊  赵昆  云孟克
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室/动物细菌病研究室,黑龙江,哈尔滨,150001
摘    要:本研究应用限制性内切酶MboⅠ消化胸膜肺炎放线杆菌血清7型的基因组DNA,回收500bp~3000bp的片段,插入到真核表达载体pCDNA3.1(+)的BamHⅠ酶切位点构建重组质粒,电转化大肠杆菌TG1,获得胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库(大约含有10^6个克隆)。将该文库随机分为10个亚文库(10个Clone pool),分别提取每个亚文库的重组质粒免疫小鼠(n=130只),免疫剂量为100μg,免疫3次后以1型胸膜肺炎放线杆菌进行攻毒,通过相对保护率、肺组织荷菌数、病理组织学3个指标测定其对小鼠的免疫保护作用。试验结果表明,Clone pool3、Clone pool2、Clone pool6和Clone pool7的免疫效果明显优于其他免疫组,尤其是Clone pool3的免疫保护效果最佳。本研究成功构建了7型胸膜肺炎放线杆菌的基因组表达文库,从而为筛选和获得新的保护性抗原基因奠定基础。

关 键 词:胸膜肺炎放线杆菌  基因组表达文库  构建  保护作用  猪传染性胸膜肺炎  放线杆菌  基因组  表达文库  小鼠  免疫保护作用  研究  library  expression  DNA vaccination  induced  mice  efficacy  抗原基因  保护性  筛选  效果最佳  免疫组  免疫效果  结果
文章编号:1008-0589(2008)02-0153-04
收稿时间:2007-02-18
修稿时间:2007-02-18

Protection efficacy in mice induced by DNA vaccination of genomic expression library of Actinobacillus pleuropneumoniae
LIU Hui-fang,ZHOU Yuan-yuan,LIU Si-guo,GONG Qiang,WANG Yong,LIU Jian-dong,WANG Chun-lai,CHANG Yue-hong,CHI Lei,ZHAO Kun,YUN Meng-ke. Protection efficacy in mice induced by DNA vaccination of genomic expression library of Actinobacillus pleuropneumoniae[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2008, 30(2): 153-156
Authors:LIU Hui-fang  ZHOU Yuan-yuan  LIU Si-guo  GONG Qiang  WANG Yong  LIU Jian-dong  WANG Chun-lai  CHANG Yue-hong  CHI Lei  ZHAO Kun  YUN Meng-ke
Abstract:
Keywords:Actinobacillus pleuropneumoniae   genomic expression library   construction   protective effect
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