| 基因C型鸭甲肝病毒VP1基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 皮晋魁,聂培婷,黄秋雪,岳华,张焕容.基因C型鸭甲肝病毒VP1基因的克隆及原核表达[J].中国预防兽医学报,2012,34(9):740-742. |
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| 作者姓名： | 皮晋魁 聂培婷 黄秋雪 岳华 张焕容 |
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| 作者单位： | 1. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041
2. 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都610041;动物医学四川省高等学校重点实验室,四川成都610041 |
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| 基金项目： | 西南民族大学中央高校专项资金项目 |
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| 摘 要： | 为原核表达基因C型鸭甲肝病毒(DHAV-C)VP1重组蛋白,本研究通过设计套式PCR引物,RT-PCR扩增DHAV-C VP1全基因,约为720 bp,将其亚克隆至pET-32a(+)载体中构建重组表达质粒pET-VP1。将其转化E.coli Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导表达了约47 ku的重组蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白可以与兔抗DHAV-C阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。
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| 关 键 词： | 基因C型鸭甲肝病毒 VP1基因 原核表达 |
Prokaryotic expression of duck hepatitis A virus genotype C VP1 gene |
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| PI Jin-kui
,
NIE Pei-ting
,
HUANG Qiu-xue
,
YUE Hua
,
ZHANG Huan-rong.Prokaryotic expression of duck hepatitis A virus genotype C VP1 gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2012,34(9):740-742. |
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| Authors: | PI Jin-kui NIE Pei-ting HUANG Qiu-xue YUE Hua ZHANG Huan-rong |
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| Institution: | 1,2(1.College of Life Science and Technology,Southwest University for Nationalities,Chengdu 610041,China; 2.Key Laboratory of Veterinary Medicine of Universities in Sichuan Province,Chengdu 610041,China) |
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| Abstract: | To express duck hepatitis A virus genotype C(DHAV-C) VP1 gene,Nested-PCR primers were designed to amplify VP1 gene from DHAV-C strain by RT-PCR and cloned into pET-32a(+) for expressing in E.coli recombinant VP1was highly expressed at 8 hour under 1 mM IPTG induction.SDS-PAGE showed the relative molecular weight of the VP1 recombinant protein was about 47 ku,and western blot analysis showed that the VP1 recombinant protein reacted with rabbit anti DHAV-C. |
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| Keywords: | duck hepatitis A virus genotype C VP1 gene prokaryotic expression |
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