| 乳酸菌Nisin诱导表达载体的构建和鉴定 |
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| 引用本文： | 郝凤奇,李景梅,杨桂连. 乳酸菌Nisin诱导表达载体的构建和鉴定[J]. 中国预防兽医学报, 2012, 34(8): 624-628 |
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| 作者姓名： | 郝凤奇 李景梅 杨桂连 |
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| 作者单位： | 1. 长春理工大学生命科学技术学院,吉林长春,130022
2. 吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130118 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，吉林省世行贷款农产品质量安全项目，吉林省科技厅科技发展计划项目，吉林省教育厅基金 |
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| 摘 要： | 为构建乳酸菌Nisin诱导表达载体,实现外源目的基因在乳酸菌中的可控表达,本研究以产Nisin乳酸乳球菌染色体DNA为模板,采用PCR技术扩增双组份调控元件nisRK基因和诱导型启动子nisA基因,并克隆至乳酸菌-大肠杆菌穿梭质粒pW425et中,以nisA基因替换原组成型启动子P32,构建乳酸菌Nisin诱导表达载体pW425N。为检测载体的诱导表达功能,以gfp基因作为报告基因,构建重组表达载体pW425N-gfp,以分离自仔猪肠道内嗜酸乳杆菌为受体菌,电转化法制备重组乳酸菌pW425N-gfp/L.acidophilus。结果表明,重组载体能够在Nisin诱导下表达目的荧光蛋白,并且最佳Nisin有效浓度为30 ng/mL,最佳诱导时间为3 h。该表达载体的构建为外源功能性蛋白在乳酸菌中的诱导表达奠定基础。
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| 关 键 词： | 乳酸菌 诱导表达载体 Nisin |
Construction and application of Nisin-controlled expression plasmid for Lactococcus acidophilus |
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| HAO Feng-qi , LI Jing-mei , YANG Gui-lian. Construction and application of Nisin-controlled expression plasmid for Lactococcus acidophilus[J]. Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine, 2012, 34(8): 624-628 |
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| Authors: | HAO Feng-qi LI Jing-mei YANG Gui-lian |
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| Affiliation: | 1.College of Life Science and Technology,Changchun University of Science and Technology,Changchun 130022,China; 2.College of Animal Science and Technology,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,China) |
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