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猪链球菌荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用
引用本文:雷宇平,王仲兵,杨治平,张仲萍,王治维,胡明明. 猪链球菌荧光定量PCR检测方法的建立及临床应用[J]. 中国动物检疫, 2017, 34(12): 84-87
作者姓名:雷宇平  王仲兵  杨治平  张仲萍  王治维  胡明明
基金项目:山西省重点研发计划一般项目(201603D221023-3)
摘    要:为快速诊断和检测猪链球菌病,根据GenBank中已登录的猪链球菌抗原基因保守区域序列,设计并合成特异性引物及Taqman探针,通过优化荧光定量PCR反应体系及扩增条件,构建了快速、准确检测猪链球菌的Taqman荧光定量PCR检测方法(Taqman FQ-PCR),测定了该方法的灵敏性、重复性和特异性,并对疑似猪链球菌临床感染样本进行了检测。结果显示:所建立的Taqman FQ-PCR方法检测灵敏度为1×10~2拷贝/μL;对3种不同浓度的猪链球菌重组质粒进行3次重复扩增,变异系数均小于3%,说明重复性好;特异性检测显示,只有猪链球菌样本的扩增曲线呈阳性反应,其他致病菌均无荧光信号;采用此方法,对30份临床疑似猪链球菌感染样本进行检测,发现有27份样本为阳性,比采用国标法检测得到的结果更加灵敏。结果表明,建立的FQPCR方法具有灵敏性高、重复性好、特异性强等特点,可用于猪链球菌的快速诊断和检测。

关 键 词:荧光定量PCR;猪链球菌;检测;探针

Establishment of Fluorescence Quantitative PCR for Streptococcus suis Detection and Its Clinical Application
Lei Yuping,Wang Zhongbing,Yang Zhiping,Zhang Zhongping,Wang Zhiwei,Hu Mingming. Establishment of Fluorescence Quantitative PCR for Streptococcus suis Detection and Its Clinical Application[J]. China Animal Health Inspection, 2017, 34(12): 84-87
Authors:Lei Yuping  Wang Zhongbing  Yang Zhiping  Zhang Zhongping  Wang Zhiwei  Hu Mingming
Abstract:
Keywords:
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