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| IBVNP基因的可溶性表达及间接ELISA方法的建立 | |
| 引用本文： | 王新卫,郝春丽,何宏轩,王泽霖,王川庆.IBVNP基因的可溶性表达及间接ELISA方法的建立[J].中国兽医学报,2009,29(6). |
| 作者姓名： | 王新卫 郝春丽 何宏轩 王泽霖 王川庆 |
| 作者单位： | 1. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002;中国科学院动物研究所,北京,100101 2. 河南农业大学,牧医工程学院,河南,郑州,450002 3. 中国科学院动物研究所,北京,100101 |
| 摘 要： | 利用RT-PCR技术将传染性支气管炎病毒M41株的N基因克隆至原核表达载体pET-28a,构建了重组表达载体pET-NP.将其转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导后,NP基因获得高效表达.经SDS-PAGE与Western blotting检测证实表达的NP蛋白具有免疫学活性,且以可溶性蛋白形式存在.以此抗原建立了检测传染性支气管炎病毒抗体的酶联免疫吸附试验 (NP-ELISA)方法.敏感性测定证实,当阳性血清1∶500倍稀释时,D450值为0.356,说明仍能检测到IB抗体,该方法比较敏感.特异性试验显示该法与AIV H9、H5、IBD、ND、EDS76的标准阳性血清不发生交叉反应,具有良好的特异性;NP-ELISA和商品化试剂盒对75份血样的阳性检出率分别为57.33%和61.33%,符合率为85%.NP-ELISA与商品化的HI试剂检测结果没有明显相关性,其效价与攻毒保护也没有相关性. |
| 关 键 词： | 传染性支气管炎病毒(IBV) 核蛋白 抗体 可溶性表达 间接ELISA |
Soluble expression of NP gene of infectious bronchitis virus in E.coli BL21 and development of ELISA on the basis of the expressed product |
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| WANG Xin-wei,HAO Chun-li,HE Hong-xuan,WANG Ze-lin,WANG Chuan-qing.Soluble expression of NP gene of infectious bronchitis virus in E.coli BL21 and development of ELISA on the basis of the expressed product[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2009,29(6). | |
| Authors: | WANG Xin-wei HAO Chun-li HE Hong-xuan WANG Ze-lin WANG Chuan-qing |
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