TMV蚕豆株系CP基因及3′端非编码区序列分析与表达 |
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作者姓名: | 刘勇 周雪平 李德葆 刘志敏 |
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作者单位: | 湖南省蔬菜研究所,浙江农业大学生物技术所,湖南农业大学园艺系 |
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摘 要: | 根据烟草花叶病毒U1株系TMV-U1序列,人工合成引物,通过PCR扩增并克隆了烟草花叶病毒蚕豆株系(TMV-B)的外壳蛋白(CP)基因和3′端非编码区.DNA全序列测定结果表明,外壳蛋白基因全长459个碱基,编码151个氨基酸,3′端非编码区全长224个碱基.与TMV-U1株系相比,TMV-B仅在CP基因上有一个碱基缺失,并导致CP基因提前终止,使其编码的氨基酸少7个.将CP基因及3′端非编码区插入pGEMEX-1的T7基因10中,转入E.coli后诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析呈现一特异的蛋白带.Western免疫检测证明,该特异带与TMV抗血清呈阳性反应.将CP基因正向插入植物表达载体PBⅠ121中,置于花椰菜花叶病毒35S启动子控制之下,获得了植物表达载体pZL5
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关 键 词: | 遗传工程 烟草花叶病毒 序列 分析/外壳蛋白基因 3′端非编码区 表达 |
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