| 适于家蚕AFLP标记的酶切反应系统 |
| |
| 引用本文： | 朱玉芳,汪宏琪.适于家蚕AFLP标记的酶切反应系统[J].江苏蚕业,2000,22(3):5-9. |
| |
| 作者姓名： | 朱玉芳 汪宏琪 |
| |
| 作者单位： | [1]苏州大学生物系,苏州 [2]江苏省浒关蚕种场,苏州 |
| |
| 基金项目： | 江苏省科委、教委自然科学基金!（A1078和21075），西南农业大学蚕丝学院开放课题基金资助 |
| |
| 摘 要： | ＡＦＬＰ作为一种新的分子标记技术，其成功的关键依赖于ＤＮＡ的酶解效果，本文使用ＰｓｔＩ、ＴａｑＩ两种限制性内切酶，选用不同的酶切方式与不同的反应离子的组合对家蚕ＢＣ１代基因组ＤＮＡ进行酶切、通过人工接头连接、二次扩增及ＰＡＧＥ电泳、银染检测，结果显示是两酶在２５ｍＭＴｒｉｓ－Ａｃｅｔａｔｅ（ＰＨ７．８）、１００ｍＭＫＡｃ、１０ｍＭＭＧＡｃ２、１ｍＭＤＴＴ反应系统中能得到多态性丰富、重复性好的ＤＮＡ指纹图谱。同时，表明寻求适宜的限制酶缓冲组分是十分重要的。
|
| 关 键 词： | 家蚕 AFLP 分子标记 反应离子 双酶切 |
Reaction System of Restriction endonuclease for AFLP marking in Bombyx mori |
| |
| Zhu Yufang,Wang Hongqi,Tan Yuande.Reaction System of Restriction endonuclease for AFLP marking in Bombyx mori[J].Jiangsu Sericulture,2000,22(3):5-9. |
| |
| Authors: | Zhu Yufang Wang Hongqi Tan Yuande |
| |
| Abstract: | AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism)is a new molecular marking technique. A successful AFLP is depended on the efficiency of endonuclease digesting DNA. Restriction endonucleases ,PstI and TaqI, was applied int applied int this experiment to excise the genomic DNA of Bombyx mori BC1 with various approaches of DNA digestion and ions.The result of silver staining indicated that PstI and TaqI was suitable in the reaction system at 25mMTris-Acetate (PH7.8)、 100mMKAc、10mMMgAc2、1mMDTT to get reliable genome polymorphism and powerful DNA fingerprinting map.It was also shown that composition of buffer must be researched in the reaction system. |
| |
| Keywords: | bombyx mori molecular marker AFLP reaction ion endonuclease digestion |
| 本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录！ |
