花生过敏原初步分离纯化及紫外光谱分析

以新鲜花生仁为原料,采用丙酮和乙醚交替脱脂,PBS浸提、硫酸铵分级沉淀,再经过透析袋处理小分子蛋白和盐离子,获得的蛋白通过葡聚糖凝胶Sephadex G-100凝胶柱分离纯化,得到花生中的主要过敏原蛋白。结果表明:该花生过敏蛋白的得率为13.5%;SDS-PAGE电泳测得花生过敏蛋白的分子量大约为15 kD和60 kD;紫外分光光度检测显示在210 nm处有最大吸收峰,且峰型单一,结合光学特征分析表明花生过敏原蛋白结构中含有双键或三键结构。