白藜芦醇处理对猪孤雌激活囊胚抗冻能力的影响

为研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)处理对猪孤雌激活囊胚抗冻能力的影响,利用2μmol/L RES在卵母细胞体外成熟、玻璃化冷冻与解冻和随后的胚胎培养过程中进行全程添加,观察其对猪孤雌激活囊胚冻后线粒体膜电位、TUNEL凋亡水平、多种Caspase活性、凋亡相关功能基因mRNA表达水平和体外发育能力的影响。结果显示:体外成熟和胚胎培养过程中添加RES能显著提高卵母细胞孤雌激活后的卵裂率和囊胚率(95.18%vs.85.79%,51.85%vs.41.46%,P0.05)。RES全程添加后其孤雌激活囊胚的抗冻能力显著提高,表现为囊胚腔恢复率和囊胚细胞数增高(35.09%vs.31.25%,37.95 vs.31.8l,P0.05),线粒体膜电位升高(0.92 vs.0.46,P0.05),囊胚细胞凋亡比例下降(8.24%vs.10.13%,P0.05),Pan-caspase、Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的荧光强度值和Caspase-8,Caspase-9,TNF-α基因表达水平下降,Bcl-2和SOD-1表达水平升高(P0.05)。与冷冻囊胚相比,新鲜囊胚的线粒体膜电位水平、Bcl-2和SOD-1基因表达量更高;细胞凋亡比例、Pan~caspase、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3荧光强度值以及Caspase-8、Caspase-9、TNF-α基因表达水平则更低(P0.05)。因此,RES全程添加可通过改善冻后猪孤雌激活囊胚的线粒体功能,降低囊胚细胞凋亡水平,从而提高其抗冻能力。