| 平邑甜茶金属硫蛋白基因MhMT2的克隆和表达分析 |
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| 引用本文： | 王顺才,梁东,马锋旺.平邑甜茶金属硫蛋白基因MhMT2的克隆和表达分析[J].中国农业科学,2012,45(14):2904-2912. |
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| 作者姓名： | 王顺才 梁东 马锋旺 |
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| 作者单位： | 1.天水师范学院生命科学与化学学院，甘肃天水748100
2.西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划项目(2008AA10Z157);甘肃省科技厅农业科技成果转化资金计划项目(1105NCNE109) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆平邑甜茶金属硫蛋白（metallothionein，MT）基因，探讨该基因对逆境的响应机理，为苹果抗逆分子育种提供依据。【方法】采用电子克隆和RT-PCR技术从平邑甜茶叶片中克隆MhMT2基因，利用生物信息学方法对获得的cDNA序列及推测氨基酸序列进行分析，通过定量PCR技术研究在胁迫条件和激素处理下该基因在叶片中的表达模式。【结果】平邑甜茶MhMT2基因cDNA全长534 bp，具有1个243 bp的完整开放阅读框，编码含80个氨基酸的多肽，其分子量为7.87 kD。同源性比对显示，MhMT2编码的氨基酸序列与其它植物的MT2蛋白有很高的相似性，其中与小金海棠的同源性最高，达到96.4%。MhMT2编码的多肽包含14个Cys残基，其N端富含Cys的结构域具有C-C、C-X-C和C-X-X-C基序，而C端仅有C-X-C基序。聚类分析显示，该基因属于植物MT2基因家族。定量PCR分析表明，MhMT2基因在叶中表达量最高，其次是根，在茎中表达量最低。在ABA、H2O2、机械损伤及NaCl处理下，该基因在叶片中的表达都上调，其中以H2O2最明显。【结论】对MhMT2基因在ABA、H2O2、机械损伤及盐胁迫下的表达模式分析，预示该基因表达水平在植物抗逆反应中起着重要作用。
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| 关 键 词： | 平邑甜茶 金属硫蛋白基因 克隆 表达 |
| 收稿时间： | 2012-03-21 |
Cloning and Expression Analysis of Metallothionein Gene(MhMT2) in Malus hupehensis |
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| WANG Shun-cai,LIANG Dong,MA Feng-wang.Cloning and Expression Analysis of Metallothionein Gene(MhMT2) in Malus hupehensis[J].Scientia Agricultura Sinica,2012,45(14):2904-2912. |
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| Authors: | WANG Shun-cai LIANG Dong MA Feng-wang |
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| Institution: | 1College of Life Science and Chemistry,Tianshui Normal University,Tianshui 748100,Gansu;2College of Horticulture,Northwest A&F University,Yangling 712100,Shaanxi) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | M hupehensis metallothionein gene cloning expression |
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