抗水稻条纹病毒安全表达载体的构建及遗传转化

构建了水稻条纹病毒（RSV）外壳蛋白（CP）基因RNAi载体pCMBIA1301+/-R，该载体在理论上可以获得无标记基因的转基因后代植株。在双菌双质粒体系中，比较了不同品种、重组农杆菌浓度配比对遗传转化效率的影响。结果表明：改进的转化体系最适合品种‘爱知旭’的转化，共转化效率达9.07%；推广品种‘武育粳3号’上也转化成功获得了转基因阳性植株（6.59%）。以‘爱知旭’为受体转化时，重组农杆菌E13R和E1301浓度比为3∶1时，共转化率最高（16.33%），其次分别是2∶1（13.56%）、1∶1(9.09%)，以1∶2时最低（5.97%）。通过T-1代自交分离和抗病性筛选，成功获得了无选择标记基因的转基因抗病毒植株16株，为抗RSV转基因水稻的安全释放奠定了基础。