| 牛nanog基原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 郑喜邦,云彦,胡勇策,王华岩,窦忠英. 牛nanog基原核表达载体构建及其在大肠杆菌中的表达[J]. 农业生物技术学报, 2008, 16(5) |
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| 作者姓名： | 郑喜邦 云彦 胡勇策 王华岩 窦忠英 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，教育部科学技术研究项目，国家自然科学基金，陕西省重大科技专项计划 |
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| 摘 要： | 从6周龄的胎牛(Bos taurus)原始生殖嵴中提取总RNA,通过RT-PCR扩增nanog基因,将其克隆到PMD-18T载体,然后再亚克隆到pGEX-KG表达载体上,获得原核表达质粒pGEx-KG-nanog,限制性内切酶分析和DNA测序证明所插入片段为牛nanog基因编码序列.重组质粒转化大肠杆菌JM109(Escherichia coli),在不同的培养温度(25、30和37℃)和不同浓度的IPTG(0.10、0.25、0.50、1.00和2.00mmol/L)诱导下均获得了表达,结果表明,培养温度和IPTG浓度对GST-Nanog融合蛋白在大肠杆菌中的表达影响甚微;经Western blot检测证实该蛋白约60kD,并具有GST抗原活性,证实目的蛋白为Nanog蛋白.
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| 关 键 词： | 分子克隆 原核表达 牛 |
Construction of Prokaryotic Expression Vector of Bovine nanog Gene and Its Expression in Escherichia coli |
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| ZHENG Xi-bang,YUN Yan,HU Yong-ce,WANG Hua-yan,DOU Zhong-ying. Construction of Prokaryotic Expression Vector of Bovine nanog Gene and Its Expression in Escherichia coli[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2008, 16(5) |
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| Authors: | ZHENG Xi-bang YUN Yan HU Yong-ce WANG Hua-yan DOU Zhong-ying |
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| Keywords: | nanog |
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