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| 柔嫩艾美耳球虫二氢乳清酸脱氢酶基因注释、克隆与原核表达 | |
| 引用本文： | 陈佳,戚南山,廖申权,吴彩艳,吕敏娜,李娟,吴玄光,孙铭飞. 柔嫩艾美耳球虫二氢乳清酸脱氢酶基因注释、克隆与原核表达[J]. 动物医学进展, 2013, 34(7) |
| 作者姓名： | 陈佳 戚南山 廖申权 吴彩艳 吕敏娜 李娟 吴玄光 孙铭飞 |
| 作者单位： | 1. 华南农业大学兽医学院,广东广州510640;广东省农业科学院动物卫生研究所,广东广州510640 2. 广东省农业科学院动物卫生研究所,广东广州,510640 3. 华南农业大学兽医学院,广东广州,510640 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，珠江科技新星项目，广东省农业科学院院长基金项目，广东省农业攻关项目 |
| 摘 要： | 二氢乳清酸脱氢酶(DHODH)是催化嘧啶从头合成途径中的关键酶,由于顶复门原虫等低等生物与其宿主的DHODH在分子结构上的差异,可以作为研发新型抗顶复门原虫药物的靶标而成为研究的热点.本研究利用电子克隆策略,以疟原虫DHODH氨基酸基因序列为信息探针,搜索球虫基因库(www.sanger,ac.uk/projects/E-tenella/),拼接注释了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)DHODH的基因序列,以E.tenella广东株第2代裂殖子总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增获得EtDHODH ORF基因序列.构建重组表达载体pCold Ⅰ-EtDHODH,进行原核表达.测序结果显示,EtDHODH的基因大小为1254 bp,SDS-PAGE鉴定结果表明,目的蛋白约45 ku.本研究重组表达并纯化了EtDHODH基因,为建立以EtDHODH为靶点的抗球虫药物筛选奠定了基础. |
| 关 键 词： | 柔嫩艾美耳球虫 二氢乳清酸脱氢酶 电子克隆 原核表达 |
Annotation, Cloning and Expression of Dihydroorotate Dehydrogenase from Eimeria tenella |
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| Abstract: | |
| Keywords: | |
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