| 利用mRNA差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因片断 |
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| 引用本文： | 王永成,巩振辉,李大伟.利用mRNA差异显示技术克隆辣椒抗疫病相关基因片断[J].北方园艺,2008(12). |
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| 作者姓名： | 王永成 巩振辉 李大伟 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,园艺学院,陕西,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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国家科技支撑计划
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教育部"春晖计划"项目
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| 摘 要： | 利用差异显示技术,以感病对照品种B27、中抗疫病品种A3、高抗疫病品种A11为试材,用辣椒疫霉菌诱导处理6叶期幼苗,进行接种前后基因差异表达分析.采用3条锚定引物5′dT12A/G/C 3′和20条随机引物(B0301-B0320)组合,进行反转录差异显示PCR,克隆并分析辣椒疫病抗性相关基因.共获得差异表达片段7条,经BLAST检索,发现T12C/B0312-251(GenBank登录号EU280142)与粉蓝烟草的推测编码ml基因的部分mRNA有90%的同源性;T12C/B0312-248(GenBank登录号EU280143)与辣椒编码区序列ERD15 mRNA有99%的同源性;T12G/B0312-339(GenBank登录号EU280144)与番茄mRNA序列113946R克隆有92%的同源性,片段T12C/B0307-170,T12G/B0317-374,T12A/B0320-235,T12A/B0320-195未发现其与已报导的序列有同源性.该试验所得的差异片段推测为与辣椒疫病抗性相关的基因.
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| 关 键 词： | 辣椒疫病 抗病基因 mRNA差异显示 |
Cloning of the Genes Resistant to Phytophthora Capsici in Pepper(Capsicum annuum L) by mRNA Differential Display Technique |
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| WANG Yong-cheng,GONG Zhen-hui,LI Da-wei.Cloning of the Genes Resistant to Phytophthora Capsici in Pepper(Capsicum annuum L) by mRNA Differential Display Technique[J].Northern Horticulture,2008(12). |
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| Authors: | WANG Yong-cheng GONG Zhen-hui LI Da-wei |
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| Institution: | WANG Yong-cheng,GONG Zhen-hui,LI Da-wei(College of Horticulture,Northwest Agricultural , Forestry University,Yangling Shanxi 712100,China) |
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| Abstract: | We extracted total RNA from the leaves of cv.B27(susceptible variety),cv.A3(medium-resis-tant variety) and cv.A11(high-resistant variety) in pepper after inoculated with Phytophthora capsici at six-leaf stage,and analyzed the different genes expression after inoculation by DDRT-PCR.Using 3' anchor primers(5'dT12A/G/C 3') and 20 arbitrary primers(B0301-B0320)at DDRT-PCR,Cloning of the Genes Resistant to Phytophthora capsici in Pepper.Finally we gained seven different expression gene fragments.The BLAST resul... |
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| Keywords: | Phytophthora blight Resistant gene mRNA differential display |
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