纽胞松弛素B(CB)对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的影响 |
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引用本文: | 卞桂华,陈自洪,杨娟,陆凤花,石德顺.纽胞松弛素B(CB)对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的影响[J].黑龙江畜牧兽医,2008(7). |
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作者姓名: | 卞桂华 陈自洪 杨娟 陆凤花 石德顺 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划),广西自然科学基金 |
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摘 要: | 研究主要探讨冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理水牛M Ⅱ期卵母细胞对其冷冻效果的影响.以水牛M Ⅱ期的卵母细胞为材料,通过玻璃毛细管(GMP)和玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG 16.5%DMSO Sucrose)对水牛M Ⅱ期的卵母细胞进行两步法玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG 7.5%DMSO Sucrose)中平衡3 min,然后再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮.冷冻前卵母细胞随机分为2组,一组用7.5μg/mL CB预处理30 min,另一组未用CB预处理作对照组,然后都冷冻保存.解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的.解冻后存活的卵母细胞进行孤雌激活,以分裂率和囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标.结果发现,GMP组和GMP CB组卵母细胞解冻后的存活率(88.89%、94.20%)和培养后发育到囊胚的比率(8.82%、14.55%)差异均不显著(P>0.05),但GMP组和GMP CB组存活卵母细胞激活后的分裂率差异显著(32.69%、55.56%,P<0.05),所以细胞松弛素B预处理可以提高GMP冷冻卵母细胞的发育能力.
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关 键 词: | 卵母细胞 囊胚 玻璃化冷冻 |
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