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鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立
引用本文:范现成,马峋,张会军,唐欢,宋军科,赵光辉. 鸡柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法的建立[J]. 动物医学进展, 2019, 40(2): 17-21
作者姓名:范现成  马峋  张会军  唐欢  宋军科  赵光辉
作者单位:西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌,712100
摘    要:为了建立一种能够快速实现对鸡柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)和巨型艾美耳球虫(E.maxima)同时进行检测的双重PCR方法,基于2种艾美耳球虫各自的ITS-1基因筛选2对特异性引物,对制备的阳性DNA样品进行PCR扩增,凝胶电泳检测结果显示,分别在约450bp和150bp处出现目的条带。对PCR反应中的退火温度、MgCl2浓度、DNA模板量等进行优化。结果表明,当退火温度为59℃、MgCl2浓度为2.5mmol/L、DNA模板量为2μL时,双重PCR扩增结果最佳。特异性检测结果显示,所建立的双重PCR对环形泰勒虫、羊巴贝斯虫、隐孢子虫和蓝氏贾第虫的扩增结果均呈阴性,表明建立的方法具有较高的特异性。成功建立了柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫双重PCR检测方法,为临床中鸡球虫病的快速诊断提供了一种可靠的检测方法。

关 键 词:  柔嫩艾美耳球虫  巨型艾美耳球虫  双重PCR

Establishment of Duplex PCR for Detecting Eimeria tenella and E. maxima
FAN Xian-cheng,MA Xun,ZHANG Hui-jun,TANG Huan,SONG Jun-ke,ZHAO Guang-hui. Establishment of Duplex PCR for Detecting Eimeria tenella and E. maxima[J]. Progress In Veterinary Medicine, 2019, 40(2): 17-21
Authors:FAN Xian-cheng  MA Xun  ZHANG Hui-jun  TANG Huan  SONG Jun-ke  ZHAO Guang-hui
Affiliation:(College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi,712100,China)
Abstract:FAN Xian-cheng;MA Xun;ZHANG Hui-jun;TANG Huan;SONG Jun-ke;ZHAO Guang-hui(College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi,712100,China)
Keywords:chicken  E.tenella  E.maxima  duplex PCR
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