| 对虾组织样品中RNA的铵盐常温保存法及其效果 |
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| 引用本文： | 杜迎彬,王志杰,杨冰,张晓华,黄倢. 对虾组织样品中RNA的铵盐常温保存法及其效果[J]. 渔业科学进展, 2013, 34(3): 88-96 |
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| 作者姓名： | 杜迎彬 王志杰 杨冰 张晓华 黄倢 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学海洋生命学院，青岛266003；农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071;中国海洋大学海洋生命学院，青岛266003；农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071;中国海洋大学海洋生命学院，青岛266003;农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所，青岛266071 |
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| 基金项目： | 公益性行业（农业）科研专项经费（201103034）和现代农业产业技术体系建设专项资金(nycytx-46) |
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| 摘 要： | 本研究以凡纳滨对虾为研究对象，取其肌肉组织28℃下保存于不同饱和度和不同pH的铵盐保存液中，保存一定时间后，通过组织总RNA提取、RT-PCR法及荧光定量RT-PCR法鉴定比较选择方便有效的保存方法。结果显示，从含25mmol/L柠檬酸钠和20mmol/L EDTA的饱和醋酸铵保存液和饱和硫酸铵保存液中保存的组织中提取的RNA较完整。通过调节pH进行保存液的优化，提取RNA后的凝胶电泳、RT-PCR及荧光定量RT-PCR确定的基因拷贝数显示，从含25mmol/L柠檬酸钠和20mmol/L EDTA的饱和醋酸铵保存液（pH 6.0）和饱和硫酸铵保存液（pH 5.2）保存的组织中能成功地提取出大量的RNA，且RNA分子完整；通过荧光定量RT-PCR法显示新鲜组织的18S rRNA拷贝数为107Copies/mg组织，保存28d后的组织18S rRNA拷贝数可达到105Copies/mg组织，而空白对照组的18S rRNA拷贝数只有103Copies/mg组织。说明保存液对于抑制核酸降解有较好的效果。这种简便有效的保存液为样品的保存、现场采集标本及后续的分子实验奠定了基础。
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| 关 键 词： | 饱和铵盐溶液；样品保存；水生动物；RNA |
| 收稿时间： | 2012-02-29 |
| 修稿时间： | 2012-08-20 |
Ammonium preservation of shrimp tissue RNA at normal temperature and its effects |
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