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甘蔗茎RNA提取方法研究
引用本文:陈萍,罗挺,蔡文伟.甘蔗茎RNA提取方法研究[J].农业科学与技术,2010,11(3).
作者姓名:陈萍  罗挺  蔡文伟
作者单位:陈萍,罗挺,CHEN Ping,LUO Ting(海南大学热带作物种质资源保护与开发利用教育部重点实验室,海南儋州,571737;海南大学园艺园林学院,海南儋州,571737);蔡文伟,CAI Wen-wei(中国热带农业科学院生物科学与技术研究所,海南海口,571107) 
基金项目:海南大学校基金,海南省教育厅高等学校科学研究资助性项目,原)华南热带农业大学科技基金 
摘    要:目的]找出提取甘蔗茎RNA的适宜方法.方法]采用SDS法、试剂盒法、GHCL法3种方法提取甘蔗茎基因组RNA,并对提取的RNA进行质量比较.结果]试剂盒法提取的RNA产率高,电泳条带清晰,RNA完整性好,无明显降解,OD260/OD280比值较好.试验操作要点:在RNA的提取过程中必须使操作温度保持在4 ℃左右(操作时温度可以通过垫加冰块来实现),从而充分抑制RNase的活性;植物组织称取要适量,将植物组织在液氮中充分研磨后,应在液氮还未充分挥发前将研磨物加入Eppendorf管中,样品要充分研磨,通过加大提取液中变性剂的量防止在此过程中内源RNase将植物组织中RNA降解;在用酚/氯仿/异戊醇抽提及氯仿/异戊醇抽提过程中,吸取上清液时,应尽量小心,不要吸取中间层从而防止酚类、蛋白质类的干扰.此外,提取的RNA还应及时保存于-70 ℃低温下,避免频繁冻融影响其质量以及RNA的降解.结论]试剂盒法是有效提取甘蔗茎RNA的方法.该研究为甘蔗的分子生物学研究奠定了基础.

关 键 词:甘蔗    提取方法

Comparison of RNA Extraction Methods of Sugarcane Stem
CHEN Ping,LUO Ting,CAI Wen-wei.Comparison of RNA Extraction Methods of Sugarcane Stem[J].Agricultural Science & Technology,2010,11(3).
Authors:CHEN Ping  LUO Ting  CAI Wen-wei
Abstract:
Keywords:RNA  Sugarcane  Stalk  RNA extraction method
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