| 禽致病性大肠杆菌HlyE蛋白的免疫原性研究 |
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| 引用本文： | 张春晓,王利丽,赵奇,孙欣艺,侯冠欣,刘畅,史秋梅,吴同垒,张志强.禽致病性大肠杆菌HlyE蛋白的免疫原性研究[J].中国预防兽医学报,2024(2):171-177. |
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| 作者姓名： | 张春晓 王利丽 赵奇 孙欣艺 侯冠欣 刘畅 史秋梅 吴同垒 张志强 |
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| 作者单位： | 河北科技师范学院河北省预防兽医学重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31802186)；;河北省高等学校科学技术研究项目(BJ2021055)；;河北省重点研发计划项目(19226629D)； |
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| 摘 要： | 为评估禽致病性大肠杆菌(APEC)溶血素HlyE蛋白的免疫原性，本研究对APEC溶血素HlyE蛋白进行原核表达和纯化，并对表达的重组蛋白进行SDS-PAGE和western blot分析，将纯化蛋白利用透析袋在4℃透析后，利用血琼脂平板对其溶血活性进行检测。SDS-PAGE和western blot结果显示，表达并纯化到分子量约为36 ku的重组HlyE蛋白(rHlyE)，经ND-2000超微量核酸蛋白测定仪测定纯化后蛋白浓度为0.65 mg/mL；溶血活性检测结果显示，rHlyE具有溶血活性。以透析后的rHlyE作为抗原，按照50μg/只的剂量免疫小鼠，对照组于相同时间点注射等量PBS，共免疫3次间隔14 d，并于首免后不同时间采血，采用间接ELISA方法检测两组小鼠血清特异性抗体水平，并于三免后18 d以2 LD50的APEC菌液攻毒小鼠，观察7 d内小鼠的死亡情况；于首免后28 d剖杀各组小鼠取其脾脏制备脾淋巴细胞，采用流式细胞术分别检测CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞亚型比率，对rHl...
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| 关 键 词： | 禽致病性大肠杆菌 重组HlyE蛋白 原核表达 溶血活性 免疫原性 流式细胞术 |
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