吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备

采用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素（JL-GolFN—α）成熟肽编码序列，将IFN—α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中，构建重组质粒pGEX—IFN—α，将重组质粒转入大肠杆菌BL21（DE3）的感受态细胞里，在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白（GST—IFN—α）。SDS—PAGE、Western—blot检测结果表明，重组吉林白鹅IFN—α融合蛋白（rJL—GoIFN-α）的分子量大小约为43ku，表达量占菌体总蛋白的25％。重组吉林自鹅仅干扰素，经谷胱甘肽Sepbarose-4B亲和柱层析纯化后，经过透析复性，得到纯化的目的蛋白，含量可达0．25mg／mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次，制备高滴度的鹅IFN—α抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN—α，并制备了兔抗鹅的IFN—α抗血清，为下一阶段鹅α干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。