吉林白鹅α干扰素基因的原核表达及抗血清的制备 |
| |
作者姓名: | 李公美 |
| |
作者单位: | 1. 吉林农业大学动物科技学院,长春,130118 2. 吉林大学畜牧兽医学院,长春,130062 3. 吉林正大实业有限公司,长春,130033 4. 九江学院,江西九江,332000 |
| |
基金项目: | 吉林省科技发展计划项目(201101112);吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目 |
| |
摘 要: | 采用PCR方法扩增了吉林白鹅α干扰素(JL-GolFN—α)成熟肽编码序列,将IFN—α片段定向插入原核表达载体pGEX-6p-1中,构建重组质粒pGEX—IFN—α,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)的感受态细胞里,在IPTG诱导下表达可溶性的融合蛋白(GST—IFN—α)。SDS—PAGE、Western—blot检测结果表明,重组吉林白鹅IFN—α融合蛋白(rJL—GoIFN-α)的分子量大小约为43ku,表达量占菌体总蛋白的25%。重组吉林自鹅仅干扰素,经谷胱甘肽Sepbarose-4B亲和柱层析纯化后,经过透析复性,得到纯化的目的蛋白,含量可达0.25mg/mL。将复性蛋白免疫新西兰白兔3次,制备高滴度的鹅IFN—α抗血清。本实验表达和纯化了鹅的IFN—α,并制备了兔抗鹅的IFN—α抗血清,为下一阶段鹅α干扰素重组蛋白的应用奠定了基础。
|
关 键 词: | 吉林白鹅 α干扰素 抗血清 |
收稿时间: | 2011-12-22 |
修稿时间: | 2012-09-03 |
本文献已被 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《中国兽药杂志》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国兽药杂志》下载全文 |
|