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ES-D3细胞nanog基因干扰载体的构建及其干涉效果*
引用本文:庄淑珍,窦忠英,杨炜峰,华进联,韩雅婷. ES-D3细胞nanog基因干扰载体的构建及其干涉效果*[J]. 农业生物技术学报, 2005, 13(6): 754-758
作者姓名:庄淑珍  窦忠英  杨炜峰  华进联  韩雅婷
作者单位:西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心,杨凌,712100
基金项目:国家自然科学基金资助项目(No.30070374,30200137),国家高技术研究与发展计划(863)项目(No.2002AA216161)和教育部重大项目(No.03160)资助.
摘    要:选择ES细胞nanog基因中4个区域合成寡聚核苷酸,构建了4个含有小鼠U6启动子的siRNA(小分子干涉RNA)表达载体并瞬时转染小鼠ES-D3细胞.半定量RT-PCR分析显示,所构建的4个siRNA表达载体中有3个可以在细胞内转录出siRNA或shRNA(短发夹RNA),诱发RNA干涉(RNAinterference,RNAi),能显著抑制目的基因nanog的表达;同时发现,干扰的ES-D3细胞生长48 h后,集落形态与未干扰细胞相比差别不大,但隆起不如后者明显,形态也不如后者规则,生长速度也较慢,AKP染色阳性,与未转染细胞相比没有差别.

关 键 词:ES-D3细胞 nanog基因 干扰载体 RNA干扰
收稿时间:2004-11-19
修稿时间:2004-12-30

Interference Vector Construction of nanog Gene of ES-D3 Cells and Their Interference Effect
ZHUANG Shu-Zhen,DOU Zhong-Ying,YANG Wei-Feng,HUA Jin-Lian,HAN Ya-Ting. Interference Vector Construction of nanog Gene of ES-D3 Cells and Their Interference Effect[J]. Journal of Agricultural Biotechnology, 2005, 13(6): 754-758
Authors:ZHUANG Shu-Zhen  DOU Zhong-Ying  YANG Wei-Feng  HUA Jin-Lian  HAN Ya-Ting
Abstract:
Keywords:ES-D3 cells   nanog gene   interference vector   RNA interference
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