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双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达
引用本文:杨敏生,李志兰,王颖,王进茂,梁海永. 双抗虫基因对三倍体毛白杨的转化和抗虫性表达[J]. 林业科学, 2006, 42(9): 61-68
作者姓名:杨敏生  李志兰  王颖  王进茂  梁海永
作者单位:1. 河北农业大学,保定,071000
2. 中国林业科学研究院亚热带林业研究所,富阳,311400
3. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101
摘    要:建立三倍体毛白杨叶片再生体系,用部分改造BtCry1Ac基因与慈菇蛋白酶抑制剂(API)基因构建的双抗虫基因表达载体,通过农杆菌介导法转化三倍体毛白杨无性系,在含卡那霉素50 mg·L-1的分化培养基上诱导产生不定芽的叶片占18%,在生根培养基上对转基因植株做进一步筛选,获得50个转化再生株系.PCR检测表明:80%的植株呈现阳性反应,部分株系进行Southern Blot检测,证明外源基因已经插入杨树基因组中.用Bt毒蛋白抗血清进行ELSA检测,结果表明:7个转基因株系都有Bt杀虫蛋白表达,表达量最高的株系约占叶总可溶性蛋白的0.016 1%.用经分子生物学检测的28个转基因株系叶片进行舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫饲虫试验,结果表明:不同株系幼虫杀死率明显不同,有39.3%的株系对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫的致死率在80%以上;25.0%的株系对两种害虫的幼虫死亡率均在60%~80%之间;另有35.7%的株系幼虫死亡率在50%以下,有些株系基本未表现出抗虫性.同时具高抗虫性的转基因株系能够明显抑制存活幼虫的生长和发育.

关 键 词:三倍体毛白杨  双抗虫基因  遗传转化  抗虫性
文章编号:1001-7488(2006)09-0061-08
收稿时间:2004-11-20
修稿时间:2004-11-20

Transformation and Expression of Two Insect-Resistant Genes to Hybrid Triploid of Chinese White Poplar
Yang Minsheng,Li Zhilan,Wang Ying,Wang Jinmao,Liang Haiyong. Transformation and Expression of Two Insect-Resistant Genes to Hybrid Triploid of Chinese White Poplar[J]. Scientia Silvae Sinicae, 2006, 42(9): 61-68
Authors:Yang Minsheng  Li Zhilan  Wang Ying  Wang Jinmao  Liang Haiyong
Abstract:
Keywords:hybrid triploid of Chinese White Poplar  two insect_resistant genes  gene transformation  resistance to insects
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