猪干扰素α-1基因的原核表达与多克隆抗体制备 |
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作者姓名: | 刘娜 李春秋 高晶 耿雨菲 王欣宇 苏明俊 魏姗 王志慧 王建发 武瑞 孙东波 |
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作者单位: | 黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江 大庆,163319 |
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基金项目: | 黑龙江省高校新世纪优秀人才项目(1252-NCET-016)。 |
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摘 要: | [目的]利用大肠杆菌原核表达系统对猪干扰素α-1(Po IFNα-1)基因进行表达,制备Po IFNα-1重组蛋白多克隆抗体。[方法]根据Gen Bank发表的Po IFNα-1核苷酸序列,合成密码子优化的Po IFNα-1基因,构建Po IFNα-1基因的p ET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌后,利用IPTG进行诱导表达。表达的Po IFNα-1重组蛋白纯化后,免疫昆明系小鼠,制备多克隆抗体。采用Western blot技术检测Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体与天然Po IFNα-1的反应性。[结果]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中成功表达,针对Po IFNα-1重组蛋白的多克隆抗体能够识别天然的猪干扰素α-1。[结论]合成的Po IFNα-1基因在大肠杆菌中获得了成功表达,为后续研究奠定了基础。
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关 键 词: | 猪干扰素α-1 原核表达 抗体制备 |
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